10×RealBlot快速轉膜液 BL609A 現貨

10×RealBlot 快速轉膜液 (10×RealBlot Rapid Transfer buffer) 產品編號 產品名稱 規格 BL609A 10×RealBlo 快速轉膜液 500 ml 產品簡介： 快速轉膜液使用*配方，能高效快速地將蛋白轉移到印跡膜（PVDF 或硝纖膜）上。 使用濕轉法（Tank blot）或半干轉法（Semi-dry blot）方法，能在 15-35min 完成轉膜過程。 快速和環保：快速轉膜液不使用甲醇，減輕了對實驗者和環境的傷害。 兼容性好：快速轉膜液能兼容 Laemmli 膠，預制膠，Bis-Tris 膠等多種凝膠。 轉移效率高：快速轉膜液對分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉移效率，有效解決了 大小蛋白不能在同一張膜上同時轉移的問題。 使用說明： 轉膜前的準備： 5-6 張裁好的濾紙；裁好的轉印膜；足夠的 1×快速轉移 buffer 一 、濕轉法（Tank blot）： 1、按照下表配制 1×快速轉膜液： 1×快速轉膜液配制量 100 ml 500 ml 1000 ml 10×快速轉膜液 10 ml 50 ml 100 ml 無水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml 超純水 70 ml 350 ml 700 ml 2、將濾紙和海綿浸泡在 1×快速轉膜液中，*浸濕。 3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗 2 分鐘，去除膠表面的 SDS；隨后將凝膠浸泡在 1×快 速轉膜液中。 注意：水中漂洗時間一定不能超過 2 分鐘，否則分子量較大的蛋白不能*轉移。 4、按照以下順序做好轉印三明治結構： 負極（陰極） 一塊海綿 2mm 濾紙 凝膠 轉印膜 1 mm 濾紙 一塊海綿（根據三明治的厚度選擇是否使用） 正極（陽極） 注意：① 要*清除三明治結構中的氣泡，適當補加 1×快速轉膜液保持三明治結構 濕潤。 ② PVDF 膜使用前要用無水甲醇潤濕 30 秒。

③ 三明治結構的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會影響轉印效果。如果太 緊的話，可以去除陽極一側的海綿或濾紙。 5、將三明治結構放于轉移槽中。 注：轉移槽中可以不用 1×快速轉膜液，可以用 1×TGS（Tris-Glycine-SDS）電泳緩沖 液取代。三明治結構中的快速轉膜液足夠保證轉膜的完成。 二、 半干轉（Semi-dry blot）： 1、按照下表配制 1×快速轉膜液： 1×快速轉膜液配制量 100 ml 500 ml 1000 ml 10×快速轉膜液 10 ml 50 ml 100 ml 無水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml 超純水 70 ml 350 ml 700 ml 2、將濾紙浸泡在 1×快速轉膜液中，*浸濕。 3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗 2 分鐘，去除膠表面的 SDS；隨后將凝膠浸泡在 1×快 速轉膜液中。 注意：水中漂洗時間一定不能超過 2 分鐘，否則分子量較大的蛋白不能*轉移。 4、按照以下順序做好轉印三明治結構： 負極（陰極） 下層濾紙 凝膠 轉印膜 上層濾紙 正極（陽極） 半干轉時，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙≧膜≧膠≧上層濾紙。上下兩 層濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會造成短路。 注意：PVDF 膜使用前要用無水甲醇潤濕 30 秒。 三 、轉移條件： 推薦使用恒流轉移 電流 轉移時間 電流 轉移時間 300 mA 30 to 35 min 375 mA 20 to 25 min 330 mA 25 to 30 min 400 mA 15 to 20 min 350 mA 25 to 30 min 保存條件： 18-26℃常溫貯存，有效期一年。

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